酶聯免疫試劑盒是一種敏感性高，特異性強，重復性好的試驗診斷辦法。由于其試劑安穩、易保存，成果判別較客觀等要素，已廣泛使用在免疫學查驗的各領域中。酶聯免疫試劑盒在國內有許多種叫法：例如：ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯免疫試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒、酶聯免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒等。
酶聯免疫試劑盒中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。加樣時應將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部，防止加在孔壁上部，并留意不可濺起，不可發生氣泡。
加標本一般用微量加樣器，按規則的量參加板孔中。每次加標本應更換吸嘴，以免發生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定需用稀釋的血清，可在試管中按規則的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參加稀釋液，酶聯免疫試劑盒再在其間參加血清標本，然后在微型震動器上震動1分鐘以保證混和。加酶結合物使用液和底物使用液時可用定量多道加液器，使加液進程敏捷完成。在ELISA檢測試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響，即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反響的完成需求有必定的溫度和時刻，這一保溫進程稱為溫育，有人稱之為孵育，在ELISA中似不恰當。
ELISA屬固相，抗原、抗體的結合只在固相表面上發生。以抗體包被的夾心法為例，參加板孔中的標本，其間的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的時機，只要貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。這是一個逐漸平衡的進程，因而需經擴散才干達到反響的結尾。在其后參加的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。這就是為什么ELISA反響總是需求必定時刻的溫育。
溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃（冰箱溫度）等。37℃是試驗室中常用的保溫溫度，也是大多數抗原抗體結合的合適溫度。在樹立ELISA辦法作反響動力學研討時，試驗表明，兩次抗原抗體反響一般在37℃經1-2小時，酶聯免疫試劑盒產品的可達高峰。為加速反響，可提高反響的溫度，有些試驗在43℃進行，但不宜采用更高的溫度。抗原抗體反響4℃更為*，在放射免疫測定中多使反響在冰箱中，以形成多的沉積。但因所需時刻太長，在ELISA中一般不予采用。
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